反向溶血空斑试验（RH-PA）中，目前常用SPA-SRBC溶血空斑试验。用SPA包被SRBC（利用SPA能与人IgG的Fc段结合的特性），将待检B淋巴细胞、SPA包被SRBC、抗Ig抗体和补体混合后浇板。抗Ig抗体可与受检B淋巴细胞产生的Ig结合，所形成复合物上的Ig-Fc段可与SRBC上的SPA结合，同时激活补体使SRBC溶解形成空斑。